、目的
建立無菌室浮游菌測試標準操作程序，規范無菌室浮游菌的檢測。
2、范圍
適用于無菌室（包括潔凈工作臺）浮游菌的測試和環境驗證。
3、職責
QA、QC人員遵照執行。
4、內容
4.1 參考標準：GB/T 16293-2010
4.2 測試方法
本測試方法為計數濃度法，即通過收集懸浮在空氣中的生物性粒子于專門的培養基（選擇能證實其能夠支持微生物生長的培養基），經若干時間和適宜的生長條件讓其繁殖到可見的菌落計數，以判定該無菌室的微生物濃度。
4.3 測試儀器、輔助設備和培養基
浮游菌采樣器、培養皿（選用與儀器相適應的培養皿）、培養基、恒溫培養箱、高壓蒸汽滅菌器。
4.4 測試狀態及測試時間
4.4.1 靜態和動態兩種狀態均可進行測試，靜態測試時，室內測試人員不得多于2人。
4.4.2 在靜態a測試時，單向流無菌室（區），測試在凈化空調系統正常運行時間不少于10分鐘后開始；非單向流無菌室（區），測試在凈化空調系統正常運行不少于30分鐘后開始。在靜態b測試時，單向流無菌室（區），測試在生產操作人員撤離現場并經過10分鐘自凈后開始；非單向流無菌室（區），測試在生產操作人員撤離現場并經過20分鐘自凈后開始。
4.5 采樣點的確定
4.5.1 最少采樣點數目見表1，每次最小采樣量見表2。
4.5.2 采樣點位置布置宜力求均勻，避免采樣點在局部區域過于稀疏，采樣點按照《潔凈區環境監控管理規程》附件×××車間潔凈度監測采樣點布局圖的要求布置，每個采樣點一般采樣一次。
4.5.3工作區采樣點位置離地0.8m~1.5m左右（略高于工作面），送風口測點位置離開送風面30cm左右，可在關鍵設備或關鍵工作活動范圍處增加測點。
4.6 測試準備
4.6.1 采樣器在進入被測區域前先清潔表面，然后用75%酒精消毒一遍或存放于被測區域內，與被測試區域一起消毒（用于A級無菌室的采樣器必須預先放在被測房間內）。
4.6.2 A/B級區采用一次性培養皿，其它區域按無菌操作要求，在中檢室潔凈工作臺上提前制備培養備用（將滅菌后的培養基用水浴溶解，冷卻至約50-60℃，Φ90mm培養皿每個傾注約20ml培養基，Φ150mm培每個傾注約30ml培養基），培養皿加蓋后在室溫下放至凝固。自制好的培養皿在無菌室內存放不超過48小時，2~8℃保存的培養皿一般不超過1周，一次性培養皿在標注的有效期內使用，過期不得使用。
4.6.3 A/B級區使用的培養皿在區域消毒前一次性傳入，隨環境一起消毒，在消毒液取用間架子上暫存，在有效期內使用。若需臨時傳入，則必須在前一天臭氧消毒前通過C級與B級傳遞窗傳入B級區進行臭氧消毒，第二天使用。傳入前表面也必須用75%酒精擦拭。其它區域用培養皿按物品傳入要求當天傳入使用。
4.6.4 采樣前，先用75%酒精清洗采樣器的頂蓋、轉盤以及罩子的內外面（FKC型浮游空氣塵菌采樣器用酒精清洗采樣頭）。
4.6.5 測試具體操作見“JYQ-Ⅱ型浮游菌采樣器標準操作程序或FKC-1型浮游空氣塵菌采樣器標準操作程序”。
4.6.6 采樣結束后，蓋上培養皿蓋子，在培養皿上標注所有信息（包括產品批號，放置位置等），將培養皿用適宜的方式捆扎，倒置于30~35℃恒溫培養箱中培養，培養時間不少于2天。
4.6.7 培養結束后逐個檢查培養皿，用肉眼對培養皿上所有的菌落直接計數、標記，然后用5~10倍放大鏡檢查，有否遺漏。若培養皿上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上菌落計數。
4.7 測試記錄應包含以下內容
4.7.1 被測試區域名稱、測試日期、測試依據、測試者姓名、測試儀器及測試方法的描述，測試時所采用的狀態和室內測試人員數，采樣點數目，測試次數、采樣流量，測試結果（包括所有統計計算資料）等。
4.7.2 若為動態測試，還應記錄現場操作人員數量，現場設備運轉情況等。
4.8 結果計算
4.8.1 用計數方法得出各個培養皿的菌落數。
4.8.2 每個測點的浮游菌平均濃度計算按下式進行
4.9 結果評定
4.9.1 每個測點的浮游菌平均濃度必須低于所選定評定標準中的界限。
4.9.2 在靜態測試時，若某測點的浮游菌平均菌濃度超過評定標準，則應重新采樣兩次，兩次測試結果均合格才能判為符合。
4.9.3 若有超過規定者，必須及時與生產部門聯系，對該區域進行消毒或其它處理，然后重新測試至合格。
4.10 日常監控
4.10.1 浮游菌日常監控設糾偏限度和警戒限度（限度范圍及取樣頻次見《潔凈區環境監控管理規程》），以保證無菌室（區）的微生物濃度受到控制，定期檢測以檢查微生物負荷以及消毒劑的效力，并作傾向分析。靜態和動態的監控都可以采用該方法。
4.10.2 對于浮游菌的取樣頻次，如果出現下列情況應考慮修改，在評估以下情況后，也應確定其他項目的檢測頻次
——連續超過糾偏限度和警戒限度；
——停工時間比預計延長；
——關鍵區域內發現有污染存在；
——在生產期間，空氣凈化系統進行任何重大的維修；
——日常操作記錄反映出傾向性的數據；
——消毒規程的改變；
——引起生物污染的事故等；
——當生產設備有重大維修或增加設備時；
——當無菌室（區）結構或區域分布有重大變動時。
